门
2017年第二届全球精准医疗(中国)峰会在上海纸蒙万里酒店圆满落幕。此次峰会邀请了一千多名精准医疗行业参与者，汇集了中韩、美英四国大咖啡专家学者、全球精准医疗领先企业高管、中美十多个优质公路表演项目、200多名顶级投资者等，洞察了精准医疗发展的前沿。
目前肿瘤诊疗已进入精密医学的时代，在精密医学的背景下，液体活检作为一种方便、微创、时效、动态反映肿瘤基因全貌的方法，在肿瘤临床研究和实践中发挥着越来越重要的作用。
液体活检的主要检查对象包括血液循环肿瘤细胞、血浆游离DNA和外分泌物。液体活检检查方法有多种，包括ARMS、NGS、数字PCR等。数字PCR和SuperARMS是近年来开发的高灵敏度新技术，适用于突变检测。
简，液体活检。
2016年肺癌的诊治进入了精密医学的时代。在精密医学的大背景下，液体活检作为一种方便、微创、有效、动态反映肿瘤基因全貌的方法，在肺癌临床研究和实践中发挥着越来越重要的作用。
2015年12月在《中华医学杂志》上发表了《非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测中国专家共识》。
我国NSCLC患者EGFR基因突变检测专家一致认为，所有NSCLC患者，不管组织学类型如何，只要条件允许，都应该尝试基于肿瘤组织的EGFR基因突变检测。
欧洲药品管理局于2014年9月批准，在难以获得肿瘤组织样本时，以外周血ctDNA作为补充样本，评估EGFR基因突变状况，以确定最能从吉非替尼治疗中受益的NSCLC患者。
CFDA于2015年2月批准更新吉非替尼手册，推荐所有NSCLC患者的肿瘤组织需要进行EGFR基因突变检测。如果肿瘤标本无法评估，可以使用从血液(血浆)标本中获得的ctDNA进行评估。可以最大限度地明确NSCLC患者，使其从齐皮蒂尼治疗中受益。
血液检查EGFR TAT时间：
建议所有专业化的EGFR基因突变分子检测实验室建立高效的分子检测平台，从接收标本到发布报告周期，在3-5个工作日内满足临床需求。
DPCR的TAT时间可以缩短到24小时。
液体活检的临床进展
注《EGFR基因突变阳性患者的全程管理》北京307医院有效厅
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数字PCR独领风骚
Diaz等对比了目前血浆ctDNA的多种高敏感度的检测方法，
指出BEAMING、dPCR、TAM-Seq可以检测到0.01％或更低的ctDNA ；
ARMS可检测到0.1％，
NGS可以检测到2％，
而Sanger sequencing可检测到>10％的ctDNA。
我们在第二届全球精准医疗（中国）峰会有幸
采访到南京科维思生物技术股份有限公司
王焱博士，并邀请她来讲一讲数字PCR
到底是一个怎么样的技术。
专访南京科维思生物技术股份有限公司
王焱博士
王焱博士个人简介
王焱博士是北京大学生命科学院学士，美国哥伦比亚大学生物学博士，美国加州理工大学生物学博士后，现任南京科维思生物科技股份有限公司董事长兼首席科学家。
04年加入美国Peptimmune生物技术公司担任临床前新药研发项目经理，06年作为科学家加入美国Helicos生物科技公司，从事高通量测序文库构建技术开发，08年在美国Epicentre生物技术公司从事高通量测序试剂产品的开发。
2012年创立南京科维思生物科技股份有限公司，致力于数字PCR相关产品的临床研发。
问
自奥巴马提出精准医疗，国内也掀起了精准医疗的浪潮。请问您对基因测序等新兴技术的市场前景和临床价值有什么看法？
答
液体活检是精准医疗中很重要的部分，JP Morgan在2016年将肿瘤液体活检分为四个领域：伴随诊断、疗效监控、预后、早期筛查。估计2020年的市场分别为20亿美元、50亿美元、40～70亿美元、90亿美元。认为相较于组织活检，液体活检在无创性、检测总成本、周转时间等方面有显著优势，是未来的发展方向。一项对病理学家的调查表明：超过95%的病理学家认为液体活检会被用于临床，其中约80%的人认为这个应用会发生在未来的3年中。
Piper Jaffray预测：2026年广义液体活检全球市场总容量约326亿美元，其中肿瘤领域286亿美元，有望应用在肿瘤早期筛查、个性化用药指导、预后判断以及治疗反应动态监测等领域。
据估计，肿瘤液体活检未来10年复合增长率约为21.7%，我国市场容量超过500亿人民币（资料来源：OncLive，银河证券营业部）。
肿瘤液体活检技术也被《科学美国人》评为2017年全球十大新兴技术，方兴未艾。南京科维思从2013年开始就在肿瘤的液体活检上做了尝试和努力。
例如这次全球精准医疗的会议，我就提到了一个研究，这个研究针对结直肠病人，从疗前、疗中、疗后三个阶段，进行系列时间点的血浆样本收集，进而找到继发耐药的突变。这个突变的价值便是从外周血里检测出组织检测不到的东西，这对肿瘤新药的研发具有一定的意义。
比如阿斯利康三代的TKI就是基于继发耐药突变开发出来的，为肿瘤的诊断和治疗拓展了新的领域。
问
国内外基因检测的临床应用在政策、行业发展等诸多方面有着很大的差异，您觉得在国内开展相关工作的难点有哪些？
答
NGS主要用于科研，但是对临床来说，灵敏度、特异度、使用方便度及上游试剂耗材的价格承受度，都是终端应用的一个问题，对于临床推广来讲有一定难度。而解决这个难点，就是要找到一个替代NGS的技术方案，这个技术方案要更适合液体活检，简单快捷而且性价比很高。
问
南京科维思在2018年有怎样的发展方向和规划？
答
数字PCR这个技术平台的本质就是PCR，只不过是在绝对定量与结果数字化方面做了拓展。并且数字PCR的灵敏度和特异度都优于QPCR，对于肿瘤低频突变的检测，实际上是一个高性价比的技术平台。
与此同时，我们一直在开发了相关的试剂产品，并进行相关的技术申报。
就物价申报来说，数字PCR虽然对标NGS，但与NGS相比，因为数字PCR技术的特殊性，它的物价可能会更高一些。
我们在全国三十多家城市有合作伙伴，而有物价申报计划的暂时是在北上广。例如我们在北京肿瘤医院，就在以LDT产品做物价申报，以及稍后的市物价申报。
12月6日我们在上海邀请了2/3检验行业的专家，参加数字PCR的沙龙。而这次的沙龙会在数字PCR技术的规范性上进行一些讨论，相关的意见与达成的共识将会在2018年看到。
问
用NGS（高通量测序）进行突变的筛查，用数字PCR针对已经发现的突变进行动态跟踪，可以使灵敏度、通量、检测的便利性有一个很好的组合。这便是芯片式数字聚合酶链式反应（DPCR分析系统）的设计初衷吗？是否可以详细讲讲这个产品未来发展方向呢？
答
NGS技术平台特点在于可同时检测很多突变，更适合组织标本，对于病人肿瘤来说，是可以得到个性化的突变图谱。数字PCR仪虽然通量低，通常会针对某一个或几个特定的位点进行检测，却因为灵敏度更高，更适合于在外周血进行动态的监测，因为这些突变在外周血的峰度的变化，实际上传递着病人复发、进展、疗效的信息。
问
南京科维思研发的芯片式数字聚合酶链式反应（DPCR分析系统）已被纳入到 CFDA“创新”特别审批程序当中，这可能将是中国第一个取得第三类注册证的数字PCR仪器，能否谈谈这个产品的特别之处？它是如何在众多PCR方法中脱颖而出的呢？
答
芯片式数字PCR相对于QPCR，有更高的灵敏度和特异度，而且绝对定量。
对于不同时间、不同地域做的检测，不同结果就有了可比性，对病人的动态监测提供了很好的机会。
而芯片式数字PCR相对于微滴式数字PCR来说，原理是接近的，优势在于：
1.批量生产的芯片其稳定性要高于微滴。
2.芯片式数字PCR会在封闭体系内完成，会避免样本之间的交叉污染。
因为PCR后的产物形成气溶胶，对于低频突变的产物来说，这一点尤其重要。
并且数字PCR仪与当前共识提到的推荐检测对比，其相似度达到94%。
问
对于新靶向药物研发及验证，数字PCR可以提供什么样子的服务和技术支持？配套试剂的开发有什么方向的考量？
答
现在的靶向药越来越多，而一些已经上市的靶向药物其实有很多专利临近过期。伴随诊断对于数字PCR技术来说是一个很大的市场。
数字PCR作为一个潜在伴随诊断的技术平台，我们期待能从新药的研发开始就参与其中。新药研发初期，可根据新药靶点的需求，进行对应试剂的开发。注册临床过程中，在药品注册的同期可进行伴随诊断试剂的注册。因为数字PCR技术定位在外周血而非组织标本，可以做到新药和伴随诊断一起上市的无缝对接。
问
最后一个问题，能否对南京科维思后续将推出的检测试剂做些简单的介绍？
答
南京科维思在芯片式数字PCR技术平台上首先会开发针对个体化用药指导的产品，比如EGFR突变检测试剂盒、HER2扩增检测试剂盒、ALK融合检测等。